V cca v 8:45 hodin přijedou účastníci na území hlavního města ulicí Ke Břvům a v cca 11:40 hodin by měl peloton vyjet z Prahy ulicí Polabská. Na trase jízdy městskými částmi Praha 1, 5, 6, 7, 8, 9, 17, 18 a 19 bude dočasně omezena doprava – pohyblivý zábor komunikace.

Trasa jízdy (cca 30 účastníků) povede po těchto komunikacích:
Ke Břvům, Hostivická, Hrozenkovská, Strojírenská, Žalanského, Čistovická, Bělohorská, Kukulova, Podbělohorská, Na Hřebenkách, Švédská, Zapova, Holečkova, Štefánikova, Matoušova, Preslova, Kořenského, Janáčkovo nábř., most Legií, Smetanovo nábř., Křižovnická, Platnéřská, Mariánské nám., Valentinská, Kaprova, nám. Jana Palacha, 17. listopadu, Čechův most, nábř. Edvarda Beneše, nábř. Kapitána Jaroše, Dukelských hrdinů, Na Ovčinách, Janovského, Strossmayerovo nám., Bubenská, nábř. Kapitána Jaroše, Bubenské nábř., Komunardů, Jateční, Jankovcova, Libeňský most, Štorchova, Voctářova, Elsnicovo nám., Zenklova, Prosecká, Čakovická, Mladoboleslavská, Vrchlabská, Železnobrodská, Semilská, Všetatská, Polabská.

Pořadatelem Cyklotour 2020 je Na kole dětem – nadační fond Josefa Zimovčáka na podporu onkologicky nemocných dětí. Průjezd hlavním městem je součástí 7. etapy 11. ročníku akce, která obsahuje prolog a 10 etap, 1233 km, 60 zastávkových měst a 333 projetých obcí a měst.